螺原体病_螺原体病简介

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所属分类:养殖技术

由螺原体引起的一种蜜蜂传染性病害。在中国有些地区每年5月是发病高峰期,又称“五月病”。1977年美国T.B.克拉克在马里兰州分离到一株螺原体,它能引起蜜蜂发病,使36%的蜜蜂死亡,随后在法国、秘鲁和美国其他各州以及中国也从病蜂分离出螺原体。

病原 螺原体(spiroplasma)它是一种螺旋纤维状、能运动、无细胞壁的原核生物(见图),具有与一般霉形体(支原体)相同的细微结构。中国大陆从病蜂分离出的一株螺原体CH-1菌株,具有典型的螺原体形态结构和运动性。螺原体菌体直径0.17微米,长度随不同生长时期而变化,在固体R-2培养基上形成直径75~210微米的近圆形或圆形菌落。CH-1菌株生长温度范围25~37℃,最适温度为28~32℃,最适pH为7.0,渗透压0.25摩尔/升蔗糖浓度在最适生长条件下48小时达到生长高峰, CH-1生长需要提供血清。并受毛地黄苷的抑制。

传播 T.B.克拉克认为蜜蜂螺原体具有传染性,其传染源来自植物的花。因为从植物花上分离出来的螺原体,对蜜蜂具有感染力,使蜜蜂患病死亡。蜜蜂食入带有螺原体的饲料时,最初蜜蜂出现呆滞、迟钝,3天后在血淋巴中可以看到螺原体,不超过7天就会死亡。即使在室温暴露20天低浓度的病原培养物,蜜蜂食入以后也会引起死亡。当然,也不排除在植物开花泌蜜期,其他昆虫带菌者吸取花蜜时,将螺原体传递给植物,当蜜蜂采集花蜜时被感染。

症状 罹病蜜蜂爬出箱外,不能起飞,在地上爬行,蹦跳,爬出的病蜂上午多于下午,阴雨转晴时增多,蜂箱前遍地死蜂,死蜂双翅展开,喙吐出。由于这种病多与其他蜂病并发,因此病蜂肠道变化不尽相同,或中肠白色肿胀,或变褐色缩小,后肠中或积臭粪,或积绿水。在发病严重时,成年蜂、青年蜂,甚至刚出房不久的幼龄蜂都相继爬出箱外,群势骤减。

诊断 用直接镜检、分离培养和血清学反应方法进行确诊。

直接镜检 取待检蜜蜂5只,放在研钵内,加无菌水5毫升,研磨、匀浆,于5000转每分离心5分钟,取上清液涂片,置暗视野显微镜下放大1500倍观察,螺原体形态清晰可见,在原地旋转。

分离培养 分离所用的培养基是由C-3G培养基稍加减化后的R-2培养基,主要成分是牛心浸出液干粉、蔗糖、马血清和酚红,调节酸碱度pH 7.2~7.4,固体培养基加0.8~1.0% (W/V)琼脂。

诊断时,先从蜂箱地上采集濒于死亡的爬蜂带回实验室分离。整个蜜蜂用1%次氯酸表体消毒2~5分钟,再用无菌水冲洗两三次。从腹部剪开,取出内脏,在2毫升R-2培养基内磨碎或洗涤,用孔径0.45纳米的微孔滤膜加压过滤。将滤出液加入R-2培养基,于30℃下培养,逐日观察培养基颜色变化,并用暗视野显微镜检查证实。

血清学检查 用液体培养的螺原体经离心洗涤后,用超声波击碎菌体,加入等量的完全佐剂免疫家兔,制备抗体血清。

用生理盐水将琼脂配成0. 65% (W/V),加入0. 5%(W/V)十二烷基硫酸钠(SDS)和0. 15%(W/V)叠氮钠,溶化后制成厚约5毫米的琼脂板。反应孔(直径5毫米)打成梅花形分布,孔间距4毫米。中间孔加抗血清,周围孔加入待检抗原,并以标准抗原和PBS作对照。置32℃下48小时,观察结果,在待测抗原、标准抗原与抗血清之间均出现一条乳白色沉淀带时,即为阳性。

防治 以预防为主,平时饲养强群,留足饲料,注意场地和蜂具的消毒,防止并发症的出现。一旦蜜蜂螺原体病与孢子虫病、麻痹病并发时,蜂群发病快,病情严重,死亡率高。在治疗上可采用抗生素,如1000毫升糖浆(糖与水为1:1)中加入四环素20万单位或红霉素10万单位。先用温水将药物溶解,再加入糖浆中,搅拌均匀,每群(10框群)喂药物糖浆150毫升,每隔5天喂1次,直到病群恢复健康为止。巢脾可用5%氯化碘溶液,或3%过氧化氢溶液和3%甲酸(或醋酸)溶液消毒24小时。然后除去巢房内的有毒液,用清水冲洗晾干,即可使用。

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